最近的研究結(jié)果表明,脂肪干細(xì)胞(ASCs)在幾個(gè)神經(jīng)退行性疾病的實(shí)驗(yàn)?zāi)P椭袌?bào)道的有益效果可能是由于外泌體的釋放介導(dǎo)其旁分泌活性所產(chǎn)生的。本研究的目的是開發(fā)一種新的外泌體標(biāo)記方法,可通過磁共振成像(MRI)來觀察外泌體在體內(nèi)的狀況。
首先,使用超小型超順磁性氧化鐵納米顆粒(USPIO, 4-6 nm),采用最佳參數(shù)來標(biāo)記的ASCs,在細(xì)胞活力、標(biāo)記效率、鐵的含量和磁共振(MR)圖像對比度方面進(jìn)行了研究。然后使用標(biāo)準(zhǔn)分離方法分離標(biāo)記的ASCs外泌體。外泌體標(biāo)記的效率通過體外和體內(nèi)獲取MR圖像以及通過確定其鐵含量進(jìn)行評估。進(jìn)行透射電子顯微鏡圖像和組織學(xué)分析驗(yàn)證了獲得的結(jié)果。
通過使用優(yōu)化的實(shí)驗(yàn)參數(shù)為ASC標(biāo)記(200 µg Fe/mL的USPIO孵育72小時(shí)),有可能將100%的細(xì)胞標(biāo)記,而它們的細(xì)胞活力仍比得上未標(biāo)記細(xì)胞;磁共振圖像在體外和體內(nèi)的檢測極限分別為10^2和2.5×10^3的ASCs。透射電子顯微鏡顯示從先前標(biāo)記的ASCs分離的外泌體保留有標(biāo)記的納米顆粒。通過MRI檢測外泌體的極限在體外和體內(nèi)分別為3 µg和5 µg。
USPIO標(biāo)記外泌體的體內(nèi)磁共振成像
參考文獻(xiàn):Busato A , Bonafede R, Bontempi P, Scambi I, Schiaffino L, Benati D, Malatesta M, Sbarbati A, Marzola P, Mariotti R. (2016) Magnetic resonance imaging of ultrasmall superparamagnetic iron oxide-labeled exosomes from stem cells: a new method to obtain labeled exosomes. Int J of Nanomedicine
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